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ドナーDNA

CRISPR-Cas9システムを用いた遺伝子ノックイン&塩基配列の挿入・欠失・置換のアプリケーションでは、ガイドRNA・Cas9ヌクレアーゼ・ドナーDNAを使用します。遺伝子ノックインあるいは塩基配列の挿入・欠失・置換をしたいゲノム上の箇所に、CRISPR Design Toolを用いてガイドRNAを設計した後に、Edit-R HDR Donor Designerを使用してドナーDNAを設計します。Cas9ヌクレアーゼは、すべての遺伝子ノックアウト用Edit-R Cas9ヌクレアーゼ試薬が使用可能です。

ドナープラスミドを使用して、蛍光レポーター遺伝子あるいは塩基配列(長さ50 nt以上)を挿入する場合、Edit-R HDR Plasmid Donor Kitを併せて使用します。

特長

ドナーDNAを直感的で簡便に設計

Edit-R HDR Donor Designerでは、ドナーDNAの設計を直感的で簡便に行うことができます。

蛍光レポーター遺伝子またはカスタム配列の挿入が可能

EGFP、mKate2レポーター遺伝子またはご希望のカスタム配列をゲノムのターゲット部位に挿入するためのドナープラスミド作製キットをご用意しています。

製品情報

一本鎖DNAドナーオリゴ

Edit-R HDR Donor Designer – oligoを使用して、目的の塩基配列(長さ50 nt以下)を挿入・欠失・置換するための一本鎖DNAドナーオリゴを設計します。CRISPR Design Toolを用いて設計したガイドRNA配列を入力し、切断位置および挿入・欠失・置換する配列を指定すると一本鎖ドナーオリゴ配列が自動的に設計され、Web上で引き続き注文いただけます。

ドナープラスミド作製時に必要なホモロジーアームPCRプライマー

Edit-R HDR Donor Designer – Plasmidを使用して、ドナープラスミド作製時に必要なホモロジーアームPCRプライマーの配列を設計します。ドナープラスミドを使用して、蛍光レポーター遺伝子あるいは塩基配列(長さ50 nt以上)を挿入する場合にご使用いただけます。CRISPR Design Toolを用いて設計したガイドRNA配列を入力し、切断位置および挿入する配列を指定すると配列が自動的に設計され、Web上で引き続き注文いただけます。

Edit-R HDR Plasmid Donor Kit

蛍光レポーター(EGFP、mKate2)遺伝子、あるいは、お客様の希望するカスタム配列をゲノムのターゲット部位に導入するために用いるドナープラスミドを、迅速かつ高効率で構築するために必要な試薬をキット化した製品です。

  • ドナープラスミドのバックボーン・蛍光レポーター配列(EGFPおよびmKate2キットの場合)・ドナープラスミド構築を確認するために用いるコロニーPCR用プライマーを含みます。
  • 製品形態は凍結乾燥品です。
  • ドナープラスミドの構築には、本キットの他に、カスタムホモロジーアームPCRプライマーや、DNA Assembly cloning Kit 等(例えばNEB社のGibson Assembly® Cloning Kit カタログ番号 E5510S)が別途必要です。詳しくは本キットのテクニカルマニュアルをご覧ください。
  • ドナープラスミドのバックボーン・蛍光レポーター配列のみを含むEdit-R HDR Plasmid Donor Components、コロニーPCR用プライマーのみを含むEdit-R HDR Plasmid Donor Primerもご用意しています。

 

製品 包装 Kitコード番号
Edit-R HDR Plasmid Donor Kit UK-008100-01-10
Edit-R HDR Plasmid Donor Kit – EGFP
Edit-R HDR Plasmid Donor Backbone 1,200 ng
Edit-R HDR insert – EGFP 250 ng
Edit-R Colony PCR Primer EGFP Forward 5 nmol
Edit-R Colony PCR Primer EGFP Reverse 5 nmol
Edit-R Colony PCR Primer Backbone Forward 5 nmol
Edit-R Colony PCR Primer Backbone Reverse 5 nmol
Edit-R HDR Plasmid Donor Kit -mKate2 UK-008200-03-10
Edit-R HDR Plasmid Donor Backbone 1,200 ng
Edit-R HDR insert – mKate2 250 ng
Edit-R Colony PCR Primer mKate2 Forward 5 nmol
Edit-R Colony PCR Primer mKate2 Reverse 5 nmol
Edit-R Colony PCR Primer Backbone Forward 5 nmol
Edit-R Colony PCR Primer Backbone Reverse 5 nmol
Edit-R HDR Plasmid Donor Kit – Universal UK-008300-01-10
Edit-R HDR Plasmid Donor Backbone 1,200 ng
Edit-R Colony PCR Primer Backbone Forward 5 nmol
Edit-R Colony PCR Primer Backbone Reverse 5 nmol
Edit-R HDR Plasmid Donor Components
Edit-R HDR Plasmid Donor & Insert – EGFP UK-008100-02-10
Edit-R HDR Plasmid Donor Backbone 1,200 ng
Edit-R HDR insert – EGFP 250 ng
Edit-R HDR Plasmid Donor & Insert -mKate2 UK-008200-04-10
Edit-R HDR Plasmid Donor Backbone 1,200 ng
Edit-R HDR insert – mKate2 250 ng
Edit-R HDR Plasmid Donor Primers
Edit-R HDR DNA Donor Plasmid Colony PCR Primer Pair – EGFP UK-008100-PP-05
Edit-R Colony PCR Primer EGFP Forward 5 nmol
Edit-R Colony PCR Primer EGFP Reverse 5 nmol
Edit-R HDR DNA Donor Plasmid Colony PCR Primer Pair – mKate2 UK-008200-PP-05
Edit-R Colony PCR Primer mKate2 Forward 5 nmol
Edit-R Colony PCR Primer mKate2 Reverse 5 nmol

各種資料 / 情報

アプリケーションノート:Edit-R CRISPR-Cas9システムを用いた相同組み換え修復による蛍光レポーター遺伝子の導入実験(日本語)

テクニカルマニュアル相同組換え修復(Homology-Directed Repair)を介した蛍光レポーターノックイン(英語)

マニュアル相同組換え修復(Homology-Directed Repair)を介したssDNAドナーオリゴヌクレオチドの導入(英語)

関連リンク

【本社サイト】HDR Knock in Templates

CRISPR Design Tool

Edit-R HDR Donor Designer